吉尔伯特·亚瑟·葛瑞森（Gilbert Arthur Grissom） 夜班主管    ——————威廉·彼德森（William Petersen）
吉尔伯特·亚瑟·葛瑞森：拉斯维加斯CSI部门的夜班主管，也是一位鑑识昆虫学家，曾在加州大学洛杉矶分校（UCLA）获得生物学学位。有个绰号叫“昆虫人”。葛瑞森通晓手语，也遗传了他妈妈的耳硬化疾病（otosclerosis），这个疾病让他逐渐耳聋，这件事也发展成第三季主要的剧情线之一。在第三季和第四季之间他进行了治疗耳硬化症状所需的手术（以及之后的恢复疗程），不过这段剧情只是一笔带过并没有播出。他的嗜好包括他的工作、赛蟑螂、阅读、与云霄飞车（香港称为过山车）。他的团队是由四个主要的CSI干员所组成，加上一组技术人员从旁协助。在前四季里，他的团队成员有：凯萨琳·韦罗斯、尼克·史多克斯、华瑞克·布朗、和莎拉·赛德尔。在第五季中期增设了午班后，他的团队现在由莎拉·赛德尔、葛瑞格·山德斯、以及苏菲亚·寇蒂丝（Sofia Curtis）所组成。

凯萨琳·韦罗斯（Catherine Willows）前夜班副主管，后午班主管    ——————玛格·海根柏格（Marg Helgenberger）
凯萨琳·韦罗斯：在前四季是夜班的副主管，当葛瑞森出城或是因为其他理由休假时，由她来主事。最近她调到新成立的午班担任主管。韦罗斯是一个血液飞溅分析师，出生于蒙大拿州波兹曼市（Bozeman）。为了支付在内华达州立大学拉斯维加斯分校（UNLV）修习医工学程的学费，曾经当过脱衣舞者。有一个小女儿，叫做琳茜（Lindsey）。很不幸的是，在前夫惨遭谋杀后，她无法找到足以将杀人凶手定罪的证据。在第三季最后一集“箱子里”（Inside the Box），凯萨琳发现她的生父是声名狼借的赌场所有人以及谋杀嫌疑犯山姆·包朗（Sam Braun）。

莎拉·赛德尔（Sara Sidle）材料元素分析师    ——————乔雅·福克斯（Jorja Fox）
莎拉·赛德尔：材料与元素分析师，在哈佛大学主修的是物理学。赛德尔原本是在旧金山的验尸与犯罪研究室工作，然后被葛瑞森挖角过来。她对葛瑞森的感觉远远多于对一个上司。赛德尔有时候会对她的工作注入太多个人情感，特别是当受害者是妇女的时候。她在一个充满著暴力与虐待的家庭中长大，在她妈妈杀了她爸爸之后，被送进了辅育机构。这些令人不悦的细节直到第四季后期才开始揭露，她也变成了一个酒精中毒者。剧情也在她酒驾被抓后达到高潮。随著第五季的剧情发展，她的问题不限于此仅这一点也越来越明显，她也开始显示出犯上（insubordination）与对证人有明显敌意的迹象。

华瑞克·布朗（Warrick Brown） 影音分析师    ——————盖瑞·杜尔登（Gary Dourdan）
华瑞克·布朗：土生土长的拉斯维加斯人，在内华达州立大学拉斯维加斯分校（UNLV）主修化学，是一位语音与影像分析师。在第一季（尤其是首集）一个主题就是他的赌瘾以及之后他的戒赌过程。他在前四季是葛瑞森团队的一员，不过在第五季中期转到了韦罗斯的午班团队。

尼克·史多克斯（Nick Stokes） 毛发纤维分析师    ——————乔治·艾德斯（George Eads）
尼克·史多克斯：随和友善的前兄弟会成员，具有刑事审判学位，是一位毛发与纤维分析师，来自德州达拉斯。在他9岁的时候，遭到一个临时女保姆的性侵害。他在前四季是葛瑞森团队的一员，在第五季中期转到了韦罗斯的午班团队。

葛瑞格·山德斯（Greg Sanders） 实验室技师    ——————艾瑞克·苏曼达（Eric Szmanda）
葛瑞格·山德斯：年轻的实验室技师，非常崇拜葛瑞森，在第五季的时候变成CSI人员，并且加入了葛瑞森的夜班团队。

艾尔·罗宾斯医学博士（Al Robbins M.D.） 法医、验尸官    ——————罗伯·大卫·霍尔（Robert David Hall）
艾尔·罗宾斯：验尸官，已婚，有三个小孩，经常只有他了解葛瑞森。双腿都是义肢，兴趣是在摇滚乐团演奏。

吉姆·布瑞斯（Jim Brass） 重案组队长    ——————保罗·盖佛尔（Paul Guilfoyle）
吉姆·布瑞斯：原来是CSI部门的主管，不过在首集最后又降回重案组。他现在是重案组的队长，也常常和CSI团队合作。已经离婚，有个叫做爱莉（Ellie）的女儿，不过后来才发现并不是他的亲生女。

 

 

 

阿奇·强森（Archie Johnson）：阿奇·高（Archie Kao）饰演，计算机与技术专家。
大卫·菲利普（David Phillips）：大卫·博曼（David Berman）饰演，助理验尸官。
康诺得·艾克利（Conrad Ecklie）：马克·凡（Marc Vann）饰演，前任早班主管，后为犯罪实验室副主管。
大卫·哈奇斯（David Hodges）：华勒斯·兰汉（Wallace Langham）饰演，实验室技师。